二硫键发生在两个半胱氨酸的自由巯基上的化学键。二硫键对于蛋白正确折叠，维持正确的高级结构，保持蛋白稳定状态等方面都至关重要。单抗分子存在12-16 对二硫键，其中链内8对，链间4-8对，这些二硫键的正确配对对于单抗分子维持构型，发挥功能非常关键。
二硫键发生在两个半胱氨酸的自由巯基上的化学键。二硫键对于蛋白正确折叠，维持正确的高级结构，保持蛋白稳定状态等方面都至关重要。单抗分子存在12-16 对二硫键，其中链内8对，链间4-8对，这些二硫键的正确配对对于单抗分子维持构型，发挥功能非常关键。在单抗生产、储存的过程中，由于各种原因会发生二硫键错配，影响抗体药稳定性、药效等， 因此二硫键分析是药物关键质量属性CQA考察内容。
百蓁生物在非还原条件下，对样本进行多酶解处理后经过质谱分析，利用PEAKS系列软件定位二硫键位点及连接方式等信息。
1.严格控制的前处理分析流程降低人工干扰
◆自由巯基标记&严格控制实验条件避免人工造成二硫键错配
◆定制化的多酶组合优化酶切效果利于二硫键鉴定
2.高端的质谱仪器确保二硫键分析的特异性和准确度
◆Thermo Orbitrap Tribid Eclipse 质谱仪以超高的分辨率和扫描速度加快数据采集速度，提高了检测的准确度
◆Bruker Tims TOF pro 质谱仪拥有离子淌度（ion mobility）模块具有4D分析功能，对低丰度二硫键肽段分析有独特优势
◆独特的仪器优势同时具备CID, EThcD, HCD, ETD等碎裂方式，为二硫键解析提供多种选择
3.PEAKS数据分析平台
◆PEAKS系列软件内置的DeepNovo算法，深度挖掘二硫键配对信息
◆PEAKS软件可分析4D-二硫键分析数据
4.专业化的售前售后服务团队，确保项目分析全流程的高效、可靠
◆专业化团队与流畅的服务流程确保了高质快速服务
◆14工作日内交付报告
送样要求 | 1. 样本新鲜制备，纯度90%以上（SDS-PAGE） 2. 样本保存在稳定缓冲液中（pH不超过6.5），不含甘油、SDS等物质，或制备后冻干 3. 样本低温保存在-80℃，干冰寄送 4. 样本量不小于100ug （BCA assay） 5. 单抗氨基酸序列 |
项目周期 | 14个工作日 |
交付标准 | 出具正式报告，报告提供抗体所有预期的二硫键配对信息以及未知的配对和错配信息、二级质谱图数据支持、相对丰度、鉴定到的单抗二硫键肽段列表、二硫键连接接方式和结构模拟图（单抗样品）等信息。 |
图 | 还原条件下和非还原条件下二硫键肽段二级质谱图
图 | 鉴定到的单抗二硫键肽段列表
图 | 二硫键连接方式和结构模拟图