高级结构（Higher-Order Structure, HOS））：即抗体（如单抗、双抗）和生物药（如融合蛋白、重组蛋白）的三维空间构象，包括一级结构（氨基酸序列）、二级结构（α-螺旋、β-折叠等局部结构）、三级结构（如抗体的Fab/Fc结构域）、四级结构（多个亚基的组装），直接影响药物的功能。

构象变化（Conformational Change）：指蛋白在不同环境条件下（温度、pH、制剂配方等）或与配体结合时发生的三维结构动态调整，包括局部柔性变化、结构域位移和聚集或降解等，对药物开发、生产工艺优化等起着至关重要的作用。
抗体/生物药高级结构解析及构象动态变化分析服务：通过HDX-MS技术精准表征抗体/蛋白质的氘代水平，解析其三维构象、柔性区域及结构域相互作用，为药物稳定性评估、工艺优化及质量控制提供关键数据支持。

百蓁生物提供基于HDX-MS的一站式生物药高级结构解析以及构象变化服务

实验流程

服务优势

▶ 经验丰富：20+成功项目案例、5篇+高分服务文章
▶ 高级结构深度解析：表位作图、构象稳定性评估
▶ 动态分析：实时监测温度/pH应力下的构象变化、聚集倾向预警
▶ 互作研究：抗体-抗原/受体结合界面、结合亲和力关联分析

应用场景 

◆ 药物开发：分析候选药物的构象稳定性，筛选高稳定性分子。
◆ 工艺优化：监测生产过程中蛋白高级结构变化，确保工艺一致性。
◆ 质量控制：评估长期储存或运输后的药物构象完整性，保障产品有效性。

案例分享 

2023年发表在Analytical Chemistry的一篇研究文章Characterization of Higher Order Structural Changes of a Thermally Stressed Monoclonal Antibody via Mass Spectrometry Footprinting and Other Biophysical Approaches，这篇文章通过整合氢氘交换质谱（HDX-MS）与多种生物物理技术研究了热应力对单克隆抗体bevacizumab高阶结构（HOS）的影响。研究中通过优化酶切条件将bevacizumab的重链（HC）和轻链（LC）序列覆盖度分别提升至93%和96%。交换时间点为 20 、 200 、 2000 和 14400s一式三份进行 HDX，以捕捉不同时间尺度的动力学现象。HDX-MS与多种技术联用揭示抗体在热应力下的局部构象变化和可能的聚集界面。

图1. HDX揭示热应激贝伐珠单抗 HOS 的局部变化(CDR 结构域用橙色框表示，PDB 结构不包含序列的区域用蓝色框表示)